miR—143在宫颈癌组织中的表达

一、研究资料和方法 
  1.研究的资料 
  笔者选取了2016年7月份到2017年7月份江苏省盐城市第一人民医院治疗的33例宫颈癌患者的数据,经实时荧光定量的聚合酶链反应(RT-PCR)对宫颈组织与内瘤变组织中miR-143表达水平进行检测。所选患者都没有实施放疗与化疗,年龄最小和年龄最大患者分别为33岁与78岁,年龄的均值是(52±2.53)岁。经病理分级得出,有24例患者为G2期,9例患者为G3期。 
  2.研究的方法 
  (1)总RNA提取 
  先选取零下80℃保存的相关宫颈组织,运用RNAiso Plus的试剂提取组织中的RNA,进行DEPC的水溶解,然后用1%甲醛变性琼脂糖凝胶的电泳对RNA的完整性进行检测,最后用紫外分光的光度计对RNA纯度与浓度进行检测。如果A260/A280在1.8~2之间,则需要实施后续的试验。 
  (2)2RT-PCR的检测 
  miR-143通过microRNA的逆转录试剂盒实施逆转录,具体反应体系是20微升,主要包含1微升的两倍Total RNA、RNase Free dH2O补足20微升、10 微升miRNA Reaction Buffer Mix、2微升miRNA Prime Script RT Enzyme Mix以及2微升0.1%BSA。反應发热条件为85℃、5秒;37℃、60分钟,将产物储存在零下20℃条件下,冻存备用。通过SYBR Premix Ex TaqTMⅡ实施PCR的扩增反应,其反应体系是20微升,主要包含6微升dH2O、10微升 SYBR Premix ExTaqTMⅡ、0.4微升ROX参比资料Ⅱ(50×)、0.8微升 PCR正向引物(10μmol)、2微升 DNA 模板以及0.8微升 PCR反向引物(10μmol)。具体反应条件为60℃、30秒;95℃、30秒以及95℃、3秒,一共进行四十个循环。内参照的基因和目的基因在扩增效率一致情况下,需要把U6当作内参照,对循环的阈值(Ct值)进行测定,同时对ΔCt值进行计算,公式为ΔCt等于miR-143Ct-U6Ct,通过2-ΔCt代表miR-143相对表达的水平。 
  3.数据统计 
  笔者把本次研究得到的数据全部记录于一个表格之中,并构建相应的数据库,于SPSS20.0 统计软件中实施计数资料和计量资料的处理。应用百分率来描述计数资料,经卡方x2进行检验,如果所得数据进行对比以后,有明显的差异,可使用P<0.05来表示。 
  二、研究的结果 
  1.在不同的宫颈组织中,miR-143表达的水平 
  在正常的宫颈组织中,miR-143表达量为(1.01±0.24),在CIN的组织中,miR-143表达量为(0.94±0.28),在宫颈鳞状的细胞癌组织中,miR-143表达量为(0.31±0.09)。在正常的宫颈组织以及CIN组织中,miR-143表达量相比以后,数值比较接近,对比显示有明显的差异,P>0.05;在正常的宫颈组织以及CIN组织中,miR-143表达量比较大,与宫颈鳞状的细胞癌组织中的相比,有明显的差异,P<0.05。 
  2.miR-143表达和临床病理的特征相关性 
  在宫颈癌的组织中miR-143表达量和病理分级、肿瘤直径、临床分期以及淋巴结转移相关(如表1所示)。 
  三、研究讨论 
  相关研究指出,在很多恶性肿瘤中,miRNas会表现出异常,而在宫颈癌的组织中,miRNA的表达变化可以辅助调控细胞周期的调节通路,并且细胞通路激活后,可以抑制其他的靶基因,所以miRNA表达可以当作宫颈癌潜在的标志物。本次研究中显示,在正常的宫颈组织以及CIN组织中,miR-143表达量相比以后,数值比较接近,对比显示有明显的差异,P>0.05;在正常的宫颈组织以及CIN组织中,miR-143表达量比较大,与宫颈鳞状的细胞癌组织中的相比,有明显的差异,P<0.05;在宫颈癌的组织中miR-143表达量和病理分级、肿瘤直径、临床分期以及淋巴结转移相关。 
  综上可知,在宫颈癌的组织中,miR-143表达量与病理分级、肿瘤直径、临床分期以及淋巴结转移相关。因此,检测miR-143表达量能够为临床治疗提供依据。 
  参考文献: 
  [1]贾伟利,郭光辉,刘雄伟等.血清microRNA在宫颈癌诊断中的诊断价值[J].心理医生,2015,(11). 
  [2]陈集敏,王康,王圣坦.不同程度宫颈病变组织中miR-143的表达与临床病理特征的关系[J].中国妇幼保健,2015,(4). 
  (作者单位:屈薇娜 安徽省滁州城市职业学院;任新萍 江苏省盐城市第一人民医院妇科)
浏览次数:  更新时间:2017-10-11 15:06:31
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